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在做PCR时,出现引物二聚体
引物设计和样品使用均是一样的情况,就是反应条件的问题二.反应条件就看你的实验操作和所使用的仪器,操作都一样的话,仪器设定上出问题的可能性会大一些,其中退货温度是比较关键的三.人品问题也会导致这样的情况四.一般减少引物二聚体的方法:.从引物自身着手,重新设计引物,这是最根本解决这一问题的办法;.可能模板有问题;.模板浓度过小,适当加大模板量;.Taq酶,引物,Mg+浓度可能过高,可降低它们的浓度;.取你所要加的上下游引物混合后,在摄氏度下的沸水中煮分钟,然后迅速拿出至于冰块之上瞬时冷却,这时再加入反应体系当中,引物二聚体就会消失的;.所配MIX中加%的甘油或者%的DMSO,可以增强特异性;.PCR反应体系的配制在冰上进行,最后加TAq酶,PCR结束后,产物勿放置在室温下过长时间,有人认为室温下有些TAQ酶会将多余的引物合成为二聚体;.增加循环数;.降低退火温度后有条带,则应逐渐提高温度,若提高温度的同时产物量减少,则考虑增加镁离子浓度(根据扩增片断长度而定,片段长则相应镁离子浓度应该高一些;.若降低退火温度,发现还是只有引物二聚体,而且镁离子的浓度在-mmol/l没有区别,则考虑Buffer等试剂没有完全融解混匀,导致吸取的试剂浓度不对;.以上次的PCR产物作模板二次PCR,可以提高引物与模板的特异性,减少引物二聚体,如果两次时间间隔短的话,可以把原产物稀释-倍,如果间隔较长可以稀释-倍佳能3680打印机驱动(直板全键盘手机)。
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联想A一体机可以自己升级吗
可以升级,但是一体机的硬件设计比较紧凑,如果不是专业人士,尽量不要自己更换硬件;而且你还要考虑更换新硬件后的供电问题散热问题...没有台式机那么方便
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